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扫描式荧光寿命成像技术简介一、扫描式荧光寿命成像技术的原理为了更详细地解释扫描式荧光寿命成像技术(FLIM),我们可以从其基本原理着手。FLIM是一种基于荧光寿命差异进行成像的技术,荧光寿命是指荧光分子在激发状态下保持的平均时间长度。这个时间由分子环境、化学组成以及与其他分子的相互作用等因素决定。在FLIM实验中,首先用激光激发样品,然后测量荧光分子返回基态前发射光子的时间。这个时间通常以皮秒到纳秒为单位,对于不同的荧光分子或同一种荧光分子在不同环境中,这个时间是变化的。通过分析这一时间的分布,可以得到荧光分子所处环境的信息。这些信息以颜色编码的形式在图像上显示,从而得到既包含空间分布又含有环 ...
荧光寿命成像技术在微塑料识别中的应用微塑料问题已成为全qiu关注的环境问题,其在多种生态系统中的累积导致了对野生生物及人类健康的潜在风险。荧光寿命成像(FLIM)技术作为一种先jin的识别手段,在微塑料研究领域显示出巨大的应用潜力。随着塑料使用量的持续增长,微塑料的环境污染问题日益严重。传统的微塑料检测方法往往耗时且效率不高。FLIM技术提供了一种高效的解决方案,能够通过分析微塑料的荧光寿命来快速识别和分类这些污染物。FLIM技术的核心在于使用荧光寿命作为区分不同物质的依据。荧光寿命是指材料被激光激发后,发出荧光持续的时间。在FLIM设备中,一个特定波长的激光被用来激发微塑料样本。样本吸收激光 ...
通过未脱膜的PMT(显微镜PMT)和补片光纤远端的光纤PMT检测。Ls,透镜系统;F1和F2,带通荧光滤波器;L2,镜头。c,在PBS-荧光素溶液中,随着NAs的增加锥形光纤的典型ξT(x,y)集合字段(每个字段归一化到其zui大值);比例尺,500µm。d,比较在pbs -荧光素溶液中扫描的双光子荧光光斑采集的光子数(像素停留时间,3.2µs),内嵌扁平切割光纤与NA = 0.66, ψ = ~4°的锥形光纤;FF图中的等值线显示锥形光纤收集到的zui大光子数。比例尺,500µm。e, NA-0.66 锥形光纤在pbs -荧光素溶液中的光子收集的等距线(顶部色条,每个像素的光子数;停留时间, ...
,同时结合了PMT的灵敏度和速度优势,并利用频域信号复用、射频频谱数字合成以及数字锁相放大,实现了千赫兹帧率的荧光成像,解决了EMCCD或者sCMOS用于流式细胞术速度不足的问题。而FIRE的核心特征在于样品上每个单独点均能够以不同射频激发荧光。在两束移频激光之间干涉所产生的拍频处,数字合成的射频“标记”了荧光发射的各个像素点。这和无线通信系统中的频率多路复用类似,FIRE图像的一行内的每个像素点都被分配了自己的射频。单元光电探测器同时检测多个像素的荧光,并从探测器输出的频率分量中重新构建图像(运用数字域的并行锁相放大来分辨)。样品中每个点能以不同的射频来激发荧光的秘诀在于其中的马赫-曾德尔干 ...
当这些光束被PMT探测到时,每个频率的小光束都携带着细胞内部空间以及位置信息,因此生成的波形图通过傅里叶变化算法可以复原空间信息,从而解构原先细胞的二维图像。宝马bm555线路可以提供G&H多种标准AODF产品,波长区域从紫外到中红外均有,并且有配套的驱动器,满足您一维以及二维扫描的各种运用。对于ICS,G&H的4200-1是您的理想声光偏转器的选择。适用于405-488nm的可见蓝紫光,并具有100MHz的射频频率工作带宽。为了更好的理解FIRE这项创新技术,我们不妨寻根究底,在下期看看发表在Nature Photonics上zui早提出FIRE (fluorescence imagi ...
(例如,来自PMT的信号、脉冲激光源的同步信号等)转换为数字信号。恒比鉴相器CFD模块非常易于使用,可以与不同的显微镜或光谱设置相结合。单通道双输出模块,区分正负输入信号,支持上升时间<500ps,抖动<15ps,zui大重复频率为140MHz,zui小输入可检测信号为+/- 100mV,zui大输出信号:4V@50Ohm 。欢迎随时与我们联系沟通FLIM系统的使用,我们会根据您的需求帮您进行权衡!了解更多FLIM系统相关详情,请访问上海宝马bm555线路的官方网页:/details-1955.html相关文献:盛翠霞,李田泽.基于时间相关 ...
偏振分析仪的PMT (CR131, Hamamatsu, Japan)进行分析。采用闭环压电三维定位平台(PI517.3CL, Physik Instrument,德国)作为扫描仪,提供纳米分辨率的运动。图3对于偏振测量,为了避免金属涂层SNOM探针的退极化效应,使用了未涂层的纤维探针。这些未涂覆的探针是通过测量它们在实验中使用的波长上的偏振特性来预先选择的。测量了不同线偏振方向的两束入射光的偏振特性。一个平行于纤维的快轴,另一个平行于纤维的慢轴。通过转动分析仪,记录光强的变化。图3显示了两个典型的归一化光强曲线,其中正方形表示入射光的偏振方向平行于纤维的快轴时的结果,三角形表示偏振方向平行于 ...
检测单元以及PMT模块转化为电压信号,输出电脑后对多种蛋白的活性进行分析。实验案例2:表征高速脉动流体流动的粒子条纹测速法莫格里奇研究所的科学家Tongcheng Qia, Daniel A. Gil, Emmanuel Contreras Guzman等开发了一种结合了高速微流控的可调节泵(Adapt-Pump)平台,并发表论文“Adaptable pulsatile flow generated from stem cell-derived cardiomyocytes using quantitative imaging-based signal transduction”。内皮细胞(E ...
时,很难确定PMT或锁相放大器探测器上观察到的信号的来源。然而,可以使用一个简短的检查表来验证信号的身份。通常情况下,应使用强谐振样品(例如,两个盖卡片之间的一层薄十二烷),并对样品施加最大可用功率(在80mhz重复频率下,对于6 ps激光系统,每个光束至少100mw)。对于CARS信号:•信号是否与泵浦光功率成二次增长,与斯托克斯光功率成线性增长?•信号是否只出现在反斯托克斯频率?•当任一光束被阻塞或时间延迟被相应数量的激光脉冲持续时间所抵消时,信号是否完全消失?•通过扫描入射激光的频率差,与文献中报道的CARS光谱相比,特征峰出现了吗?对于SRS信号:•信号是否随泵浦功率和斯托克斯功率线性 ...
光电倍增管(PMT)进行检测(PMT: H7422-P40 Hamamatsu, Bridgewater, NJ, USA;放大器:信号恢复AMETEK先进测量技术,沃金厄姆,英国)。PMT从来自DOE的多个小束同时激发的所有点收集发射光。在这种激励-促进机制下,波束的水平方向并不是严格要求的。相对于感兴趣的特征,小的波束间距是关键,然而水平方向是最直接的应用。这种成像方式稍微降低了沿小波束方向的成像的空间分辨率,但随着时间的推移增加了每个成像像素的集成强度,因为每个像素都被采样了多次,每个小波束一次。可以通过旋转DOE来改变波束的水平或垂直方向,以保持沿某一特定轴的最大分辨率,同时牺牲沿另一 ...
光电倍增管(PMTs)被用来检测。然而,CARS受到由其他非共振非线性光学效应产生的背景的影响。这些效应不仅限制了CARS测量的实际检测极限,而且还扭曲了光谱(与分子振动共振相比)。另一方面,SRS信号不受大多数其他非线性光学效应的干扰。然而,SRS是一个受刺激的发射过程。信号发生在与入射光线相同的波长上。SRS效应只是稍微增加/减少了斯托克斯和泵浦光束的光子数量,分别。这些变化是如此之小,以至于无法用常规的时域测量方法来测量。因此,SRS需要有锁定检测的光学泵探技术。光学泵-探针技术和锁定检测泵-探针法是一种广泛采用的检测多光子过程的方法。该实验通常涉及两个超快(皮秒或飞秒)激光束。一束激光 ...
0 CCD/PMT双路探测器 256位线性TEC制冷/光电倍增管 波段:380-780nm 亮度范围:0.003-17,000,000nitsPR-788 CCD探测器 512位线性TEC制冷 波段:380-780nm 带宽:5nm 亮度范围:0.000034-6,850,000nitsPR-730/740 CCD探测器 512位线性TEC制冷 波段:380-780nm 带宽:2,5或8nm 亮度范围(PR-730):0.00034-19,000,000nits;亮度范围(PR-740):0.000034-680,000nitsPR-735/745 CCD探测器 512位线性TEC制冷 波段: ...
光电倍增管(PMT)与时间相关检测相结合,能够在时域内实现高灵敏度的信号检测。利用光纤的色散规律可以推导出常规的拉曼光谱。图1图1为该方法的原理图。图1显示了拉曼信号和荧光信号在取样后不久(见上图)以及在光纤中传播足够长的距离(见下图)后的频率-时间分布。在上图中所描述的情况下,当信号刚从样本发出时,拉曼峰在频域可以分离,而在时域则是混合的。在足够长的光纤中传播后,由于色散规律,不同频率的峰值在时间上被分离。相反,与瞬时和瞬态拉曼信号不同,荧光发射具有更长的寿命。通过对光纤输出信号的投影,我们可以分离不同的拉曼峰,也可以对荧光进行拉曼信号的区分。图2中在最后还可通过档位式反射镜将信号引入到光谱 ...
偏振分束镜;PMT1、PMT2:光电倍增管。荧光信号分为低信噪比 (~10%) 分量和高信噪比 (~90%) 分量,并由两个 PMT 同步检测。视频1:DeepCAD 在单神经元记录上的去噪性能。视频上部为神经元的同步电生理记录,反映了真实的神经活动。检测到的尖峰用黑点标记。原始噪声数据和 DeepCAD 增强数据分别显示在视频中部和下部。视频2:从左到右分别是大型神经元群(第 2/3 层,GCaMP6f)的自发钙瞬变的低信噪比记录、DeepCAD 增强对应和相应的高信噪比记录。底部显示了局部区域的放大视图。视频3:相同的预训练模型用于跨系统的数据去噪仍然有效。视频中数据来源于三个不同系统设置 ...
光电倍增管(PMT),带通滤光片F2选择需要的非线性信号(CARS/SHG/TPEF),透镜L2将光信号聚焦在PMT上。(2) 双芯双包层光纤。如图2 ,纤芯1直径4.8um,截止波长836nm;纤芯2直径6.3um,截止波长970nm。分别用于引导795nm泵浦光和1030nm斯托克斯光,内包层掺氟,直径60um。125um直径纯石英双包层,被直径为230um的掺氟聚合物包裹。包层用于信号采集。(3) 内窥镜探头。DCDC光纤由谐振压电扫描引导(作螺旋模式扫描,1240Hz),经直径为2mm的GRIN透镜,衍射光栅将泵浦光和斯托克斯光组合进入下一步的光路,见图3a。图3b为泵浦光和斯托克斯光 ...
电倍增管 (PMT, HamamatsuH7422-20) 无需解扫描。PMT 信号用 LIA (Zurich Instruments HF2LI) 在调制频率为 20.25 MHz。对于 FM CARS 测量,使用了如图1所示的 FOPO ,而对于标准 CARS 测量,M1 的反馈路径被机械快门阻挡。为了量化 FM CARS 与标准检测灵敏度相比所实现的增加测量了含有 dDMSO 和水的 CARS 稀释系列。对于该测量,dDMSO 的共振在2125 cm-1和大约 2145cm-1处的非共振贡献以相同的平均功率处理在成像平面中大约 20 mW。对于此特定测量,LIA 检测带宽设置为 1 Hz ...
能特别重要。PMT(取决于设计)可以处理高达每秒 1 到 20 百万次计数 (cps) 的计数率。基于老式 NIM 的 TCSPC 电子设备最多能够处理 50,000 到 500,000 cps。采用现代集成 TCSPC 设计,例如 TimeHarp 260,可实现高达 40 Mcps 的计数率。韩国Nanobase 共聚焦光路结合PicoQuant单光子计数技术可实现高效率荧光寿命成像。您可以通过我们的官方网站了解更多的产品信息,或直接来电咨询4006-888-532。 ...
电倍增管 (PMT)、微通道板 (MCP)或单光子雪崩二极管 (SPAD)。 假设每个周期记录一个以上光子的概率很低,每个时间段光子到达形成的直方图表示从单次时间分辨模拟记录中获得的时间衰减。 如有必要,可以通过衰减样品处的光来满足单光子概率的前提条件。如上图说明了如何在多个周期内形成直方图。激光脉冲反复激发产生光致发光。 激发和发射之间的时间差是由像秒表一样的电子设备测量的。 如果满足单光子概率条件,实际上在许多周期中根本没有光子。应该注意的是光子或空循环的出现完全是随机的,只能用概率来描述。 因此,这同样适用于各个秒表读数。如上图所示,秒表读数被分成一个由一系列“时间段”组成的直方图。 时 ...
光电倍增管(PMT)进行探测。然而,CARS的探测同时会受到一些其他非共振非线性光学现象产生的背景。这些背景限制了实际使用这种CARS的检测极限,并同时使所测得的光谱与自发拉曼相比产生一定畸变。另一方面,SRS信号不受到大多数其他非线性光学现象的影响。然而,SRS的信号本身发生在与输入光源相同的波长。SRS现象本身只相应的稍微减弱或增加泵光或者斯托克斯光源。这些相应较小的变化很难用常规方法进行探测,因此,需要使用泵浦-探测以及锁相法进行探测。光学泵浦-探测以及锁相探测泵浦-探测是多光子探测中常用的方法。这些试验通常使用两束超快激光。一束激光时刻对样品进行照射,另一束激光则通过调幅调制在一个固定 ...
光电倍增管(PMT))进行检测。但是,CARS受其他非共振非线性光学效应所产生的背景的影响。 这些影响不仅限制了CARS测量的实际检测极限,而且使光谱失真(与分子振动共振相比)。 另一方面,SRS信号不受大多数其他非线性光学效应的干扰。 但是,SRS是受激发射过程。 信号以入射光相同的波长发生。 SRS效应仅略微增加/减少了斯托克斯束和泵浦束的光子数量。 这些变化很小,以至于无法通过常规的时域测量方法进行测量。 因此,SRS需要具有锁相检测功能的光泵浦探测技术。光学泵浦探测技术和锁定检测:泵浦探针法是用于多光子检测过程的一种普遍采用的方法。该实验通常涉及两束超快(皮秒或飞秒)激光束,一束光一直 ...
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